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高效液相色谱柱的故障排除

 1、柱压过高


可能是微粒堵塞. 柱床膨胀,不可逆吸附, 细菌生长等造成的。也
有可能是系统反压问题, 例如阻尼器堵塞,进样器堵塞, 管路或连接口
堵塞. 在线过滤器不干净, 压力传感器不准确等。
2、柱效低
可能是色谱柱被污染、 过滤片部分堵塞、色谱柱内的死体积造成,
例如流动相p H值或者组成不合适造成固定相损失。 流动相急剧变化
造成固定相物理损坏, 机械振动造成固定相产生裂缝,柱床收缩或干
枯。
也有可能是仪器连接的问题, 认真检查进样器、检测器、 管路、 保
护柱和在线过滤器等是否连接好,也可能是色谱柱没有平衡好, 进样
量过大等问题。
3、重复性差、不出峰、回收率低
可能是色谱柱被污染, 流动相 p H值或者组成不合适造成固定相
损失 , 样 品溶剂 不同或样品本身不稳定, 固定 相极性过强或者流动相
极性过弱. 或者发生非特异性吸附。
也可能梯度实验时平衡时间不足,温度波动, 流动相组成改变, 样
品溶剂不同, 样品稳定性不好,方法的开发不好, 缓冲液的酸碱度不合
适或者缓冲能力不足。

 

 

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